快速纯化多种生物分子，如蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸、核苷酸疫苗、病毒及天然小分子（TCM）等。

AKTA pure蛋白纯化系统主要用于快速纯化和分离蛋白质等生物活性分子，适合广泛的科研应用和多用户环境下的纯化任务，适合微克到毫克级生物分子的分析和制备。其拥有业内最精准的流速控制系统，能够进行恒压调速并可以自动对压力进行补偿，提供可靠稳定的流速和梯度形成能力，确保样品在整个纯化流程中始终保持生物活性，最终获得高纯度的具有活性的生物分子，是制备型和分析型兼备的快速纯化液相色谱系统，适合需要提纯蛋白样品的实验室。

操作说明：

1、开机

打开仪器的主电源，打开电脑电源。待仪器自检完毕（主机控制面板白灯常亮）。双击桌面上UNICORN 图标，进入操作界面。

2、准备工作溶液和样品

所有的工作溶液和样品必须经过 0.45µm的滤膜过滤（样品也可高速离心后取上清使用）。缓冲液需在使用前用低频超声脱气 15 min。

3、清洗及管道准备

首先将 A1 管道入口放入平衡缓冲液（binding buffer）中，将 B1 管道入口放入洗脱缓冲液（elution buffer）中，在system control 窗口点击工具栏内的manual，选择 execute manual instructions→pump→pump A wash 和pump B wash，选中 A1 和B1 入口，点击execute。泵洗完成后自动停止。如管路中未充满液体，可以选择使用注射器手动抽气。将注射器插入各泵头的排气阀中，拧开排气阀后，手动抽出液体，直至管路充满液体。

4、 安装层析柱

在manual instructions 里选择pump→system flow，输入流速 1 ml/ml，insert；选择Alarms→alarm delta column pressure（如果没有配制多柱位阀，则设置alarm pre column pressure），设置high alarm（输入柱子的耐受压力，可在填料说明书中查到），insert，execute。待 Injection Valve 的col 位管道流出溶液后，将管路接入柱子的上端，稍微拧紧后将柱下端的堵头卸掉接入管道，连上紫外流动池。

5、 开始纯化：

    1)选择检测波长，Monitors→Wavelength→UV1, UV2, UV3 (可以只打开一个波长) 等待柱子平衡好了（观察UV、COND、pH 的数值和变化趋势）就可以准备上样。此时将紫外调零，选择 Monitors→auto zero UV，execute。

2)用样品环上样：用注射器吸取binding buffer 冲洗样品环，将样品吸进注射器，推掉气泡，从injection Valve 的Syr 号位推入, 上样后不要取下注射器。在manual instructions 里选择flowpath→ injection Valve→inject，execute。

3)用泵上样：将 A2 入口放入样品中（A2 管路事先用平衡buffer 冲洗过），manual instructions 里选择flowpath→A inlet→A2, insert, flowpath→inject mark, insert, execute 待样品上完后，在manual instructions 里选择flowpath→A inlet→A1, 使用平衡缓冲液继续清洗柱子。

4), 5)任选一种方式

4)洗脱：上样后用平衡缓冲液尽量将穿透峰洗回基线。在 manual instructions 里选择pump→ gradient，按照自己的工艺选择target B（100％）和length（10CV）。

5)设定收集：

选择Fraction collection→Fractionation, 选择收集管tube type，输入每管收集体积，execute。结束固定体积收集选择Fraction collection→Stop fractionation，execute。

6、清洗泵及卸下层析柱：

将 A1，A2 和B1 等实验使用管路入口依次放入纯水中，分别启动pump wash 功能冲洗A 泵和B泵及各个管路。然后再将各入口放入 20％乙醇中，同样操作让乙醇充满各个管路。给系统一个慢流速， 设置层析柱保护压力，然后先拆柱子的下端接头，在滴水的状态下将堵头拧上。再拆柱子上端接头， 拧上上端堵头。整个过程防止气泡进入层析柱。

7、关闭电源：从软件任一窗口File 命令栏中点击退出。关闭 ÄKTA 主机电源，关闭电脑电源。

1、全自动微量柱塞泵，双泵四泵头，每个泵头都有独立除气阀；

★2、单泵流速：0.001～25 ml/min，双泵装柱模式：0.1～50 ml/min；

3、压力范围：0～20 MPa；

★4、流速重复性：条件：0.25～25 ml/min, < 3 MPa, 0.8～2 cP；流速准确度：±1.2%，流速精度：RSD<0.5%；

5、粘度：0.35～10 cP；

6、具备恒压调速功能，自动根据压力调节流速输出，使压力保持稳定；

7、波长范围：全波长检测器，190 -700 nm；检测波长：通过单色器可以连续选择、同时检测波长范围内任意3个波长；

8、检测范围：-6～+6 AU，线性：±2%，在0～2 AU之间；

9、光源和流动池应采用分开设计，避免光源过热对样品的影响；

10、电导检测范围：0.01～999.99ms/cm，宽广的电导检测范围，易于做疏水和离子交换层析；

11、温度范围：0～99℃，温度准确度：± 1.5℃在4℃～45℃C之间；

12、可根据体积或峰自动收集，兼容3、8、15、50ml的收集管，试管容量最多可达350管，收集范围：0.1ml～50ml；

13、具有滴感应器，防滴漏功能，流路应为PEEK惰性材料（以保持蛋白活性），耐受有机溶剂